Regolamento (UE) 2017/735

Modifica dell’allegato del regolamento (CE) n. 440/2008

L’articolo 1 dispone la modifica dell’allegato del regolamento (CE) n. 440/2008 conformemente all’allegato del regolamento. L’allegato introduce nuovi capitoli e sostituisce capitoli esistenti, adeguando i metodi di prova REACH alle linee guida OCSE più recenti.

Nuovo metodo A.25 sulle costanti di dissociazione in acqua

Viene aggiunto in parte A il capitolo A.25, relativo alla determinazione delle costanti di dissociazione in acqua con metodo della titolazione, spettrofotometrico o conduttimetrico. Il metodo è indicato come equivalente alla linea guida OCSE n. 112 (1981) e contiene prescrizioni su principi, criteri di qualità, condizioni sperimentali, calcolo dei risultati e relazione di prova.

Sostituzione del capitolo B.5 su irritazione/corrosione oculare acuta

Il capitolo B.5 è riscritto integralmente per recepire la linea guida OCSE n. 405 (2012). Il nuovo testo enfatizza l’analisi peso dell’evidenza, le strategie sperimentali sequenziali, l’uso sistematico di anestetici topici, analgesici sistemici ed endpoint umanitari, e la preferenza per metodi alternativi prima del ricorso al test in vivo sul coniglio.

Sostituzione del capitolo B.10 sulla aberrazione cromosomica in vitro nei mammiferi

Il capitolo B.10 viene sostituito per allinearlo alla linea guida OCSE n. 473 (2016). La prova identifica sostanze chimiche che causano aberrazioni cromosomiche strutturali in colture di cellule di mammifero, disciplina scelta delle cellule, attivazione metabolica S9, concentrazioni, citotossicità, controlli, criteri di accettabilità, interpretazione e contenuti della relazione.

Sostituzione del capitolo B.11 sulla aberrazione cromosomica del midollo osseo nei mammiferi

Il capitolo B.11 è riscritto in conformità alla linea guida OCSE n. 475 (2016). Il metodo in vivo sul midollo osseo resta finalizzato a individuare aberrazioni cromosomiche strutturali nei roditori, con regole dettagliate su competenza del laboratorio, dosi, campionamento, controlli, criteri di interpretazione e relazione.

Sostituzione del capitolo B.12 sulla prova dei micronuclei negli eritrociti di mammifero

Il capitolo B.12 è sostituito secondo la linea guida OCSE n. 474 (2016). Il test dei micronuclei, effettuabile su midollo osseo o sangue periferico, consente di rilevare danni cromosomici o all’apparato mitotico; il testo disciplina specie, controlli, dosi, tempi di campionamento, metodi manuali o automatizzati, criteri di accettabilità e interpretazione.

Sostituzione del capitolo B.47 sul metodo BCOP

Il capitolo B.47 è sostituito dal metodo di prova dell’opacità e permeabilità della cornea bovina, equivalente alla linea guida OCSE n. 437 (2013). Il metodo è usato per identificare sostanze che inducono gravi lesioni oculari o che non richiedono classificazione per irritazione oculare/gravi lesioni oculari, con soglie IVIS, regole su oculari bovini, controlli, criteri decisionali e relazione di prova.

Sostituzione del capitolo B.48 sul metodo ICE

Il capitolo B.48 è sostituito dal metodo di prova sull’occhio isolato dei polli, equivalente alla linea guida OCSE n. 438 (2013). Il metodo, basato su opacità, rigonfiamento e ritenzione di fluoresceina, è impiegato per identificare sostanze corrosive o gravemente irritanti e, in determinate condizioni, sostanze non classificate, con regole di classificazione e specifiche di validazione.

Sostituzione del capitolo B.49 sul micronucleo in vitro

Il capitolo B.49 viene riscritto in conformità alla linea guida OCSE n. 487 (2016). La prova in vitro dei micronuclei rileva micronuclei in cellule di mammifero in interfase, con o senza citocalasina B, e prevede criteri dettagliati su cellule, attivazione metabolica, citotossicità, controlli, calendari di trattamento, criteri statistici e relazione.

Aggiunta dei capitoli B.59 e B.60 sulla sensibilizzazione cutanea

Sono introdotti due metodi non animali: il DPRA (B.59), saggio in chemico di reattività peptidica diretta, equivalente alla linea guida OCSE n. 442C (2015), e il saggio della luciferasi ARE-Nrf2/KeratinoSens (B.60), equivalente alla linea guida OCSE n. 442D (2015). Entrambi servono a distinguere sensibilizzanti cutanei da non sensibilizzanti nell’ambito di approcci integrati IATA, con criteri tecnici, controlli e modelli predittivi specifici.

Aggiunta del capitolo B.61 sul test di diffusione della fluoresceina

È introdotto il metodo FL, equivalente alla linea guida OCSE n. 460 (2012), utilizzato per identificare sostanze acquose corrosive o gravemente irritanti per gli occhi sulla base della permeabilità di monostrati di cellule MDCK alla fluoresceina, con soglia FL20 e regole di accettazione.

Aggiunta del capitolo B.62 sul test della cometa in vivo

È introdotto il test della cometa in vivo in condizioni alcaline, equivalente alla linea guida OCSE n. 489 (2016), finalizzato a rilevare rotture dei filamenti del DNA in tessuti di mammiferi, con indicazioni su competenza del laboratorio, scelta dei tessuti, dosi, campionamento, preparazione dei campioni, analisi, interpretazione e limiti del metodo.

Riforma della parte C sul bioaccumulo nei pesci

Il capitolo C.13 è sostituito e articolato in tre sezioni: prova di bioconcentrazione in ambiente acquatico a flusso continuo, prova ridotta e prova di bioaccumulo per via alimentare. Sono introdotti criteri dettagliati per scelta del metodo, qualità dell’acqua, alimentazione, campionamento, normalizzazione lipidica, correzione per crescita e calcolo di BCF e BMF.

Sostituzione del capitolo C.20 sulla riproduzione con Daphnia magna

Il capitolo C.20 è sostituito dal metodo OCSE n. 211 (2012), relativo alla prova di riproduzione su Daphnia magna. La disciplina aggiornata prevede prova di 21 giorni, controllo della riproduzione, criteri di validità, gestione della mortalità parentale, statistiche per NOEC/LOEC ed ECx, e specifiche per mezzi di coltura e alimentazione.

Adeguamenti e soppressioni collaterali

Il regolamento modifica o elimina ulteriori parti dell’allegato del regolamento (CE) n. 440/2008, tra cui la soppressione di alcuni capitoli nella parte B e aggiornamenti nel capitolo C.29. Le modifiche sono volte a rimuovere metodi superati e a coordinare il corpus tecnico con le linee guida OCSE e con gli obiettivi di riduzione della sperimentazione animale.

Entrata in vigore e applicabilità

L’articolo 2 stabilisce che il regolamento entra in vigore il ventesimo giorno successivo alla pubblicazione nella Gazzetta ufficiale dell’Unione europea. È inoltre precisato che il regolamento è obbligatorio in tutti i suoi elementi e direttamente applicabile in ciascuno degli Stati membri.